PCR實(shí)驗(yàn)室
PCR實(shí)驗(yàn)室由緩沖區(qū)及四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域
緩沖區(qū)、試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制
PCR實(shí)驗(yàn)室關(guān)鍵控制好各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保住各實(shí)驗(yàn)區(qū)的階梯式壓力要求及達(dá)到安全排放標(biāo)準(zhǔn)。
Pcr實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱(chēng)。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級(jí)別，精確檢測(cè)乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人適合使用哪類(lèi)抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床緩解提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù)
PCR實(shí)驗(yàn)室建立方法
1、建立樣品準(zhǔn)備區(qū)
這個(gè)區(qū)域?qū)ｉT(mén)用作樣品的準(zhǔn)備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采取預(yù)防措施:⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的DNA克隆不能在這個(gè)房間操作。⑵組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷DNA樣品應(yīng)該用有專(zhuān)門(mén)的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時(shí)有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨(dú)包裝的無(wú)菌一次性移液管吸取。⑹管子打開(kāi)前都要簡(jiǎn)短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開(kāi)，這樣會(huì)產(chǎn)生氣溶膠。⑺任何時(shí)候都應(yīng)該穿實(shí)驗(yàn)服和帶手套，手套要經(jīng)常更換，尤其在抽提過(guò)程中每一步之間都要更換。實(shí)驗(yàn)服要專(zhuān)門(mén)用于樣品準(zhǔn)備間，經(jīng)常清洗。
2、樣品準(zhǔn)備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì)。為了避免這一問(wèn)題，反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報(bào)道。
3、建立前PCR區(qū)。
該去專(zhuān)門(mén)用于準(zhǔn)備各種反應(yīng)，這個(gè)區(qū)域必須保持干凈，而且沒(méi)有來(lái)自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備，特別是專(zhuān)門(mén)用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
4、PCR實(shí)驗(yàn)室試劑的操作。
⑴所用的所有溶液都應(yīng)該沒(méi)有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。⑵所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過(guò)濾的，并且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類(lèi)的抗微生物劑，在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。⑷所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。⑸所有試劑和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。⑺樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。
5、在前PCR區(qū)建立PCR混合物。
⑴可以把即刻可用的"主混合物"溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃，在實(shí)驗(yàn)室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。⑵如果你的實(shí)驗(yàn)室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì)，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個(gè)規(guī)則，應(yīng)該保存一套陰性、弱陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照樣品來(lái)分析樣品配制和PCR前過(guò)程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過(guò)使用一個(gè)已知的弱陽(yáng)性樣品來(lái)驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時(shí)做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染，陰性對(duì)照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。⑸當(dāng)做陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，有兩個(gè)理由決定了應(yīng)該使用少數(shù)量的核酸。⑹由于必須有對(duì)照反應(yīng)，對(duì)照模板的特點(diǎn)應(yīng)該予以考慮。
6、控制污染的方法。
已設(shè)計(jì)出很有力的酶學(xué)方法用來(lái)消除一種形式的污染-使用UNG，這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除污染問(wèn)題，但可以將污染降低幾個(gè)數(shù)量級(jí)。
7、后PCR區(qū)PCR完成以后，需要分析樣品并解釋數(shù)據(jù)，應(yīng)該留出一個(gè)專(zhuān)門(mén)用于反應(yīng)后處理樣品的地方。后PCR活動(dòng)中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專(zhuān)門(mén)用于這一目的，決不能把實(shí)驗(yàn)室這一區(qū)域的試劑或儀器用于任何前PCR活動(dòng)
PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)
基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱(chēng)PCR實(shí)驗(yàn)，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，如：檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病，癌基因的檢測(cè)和診斷，DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、親子鑒別及法醫(yī)物證，動(dòng)、植物檢疫，動(dòng)物及其衍生產(chǎn)品檢測(cè)，動(dòng)物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測(cè)，轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測(cè)等。
PCR設(shè)計(jì)依據(jù)
《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增管理法》
《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》 GB50346-2004
《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》GB50073-2001
《空氣過(guò)濾器》GB13554-92
《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》GB19489-2004
《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》WS233-2002 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部
PCR實(shí)驗(yàn)室平面布
基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室又稱(chēng)PCR實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域，前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)->樣品處理區(qū)->擴(kuò)增區(qū)->擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間，工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗(yàn)工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的工作室，并有明顯的標(biāo)志，各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連，需安裝物品傳遞窗。每個(gè)工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈的波長(zhǎng)為254 nm，安裝數(shù)量為每20 m2安裝一支40W的紫外燈。
實(shí)驗(yàn)室較為理想的布局模式為有一個(gè)專(zhuān)用走廊，試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范地排列在一起，前三個(gè)區(qū)各有一個(gè)緩沖間，可供換工作服和工作鞋使用，頂上可裝一紫外燈。內(nèi)實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)為正壓或常壓狀態(tài)，緩沖間內(nèi)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)（可上設(shè)一抽風(fēng)裝置），使這三個(gè)區(qū)的空氣流向?yàn)橛蓪?shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)向外，緩沖間內(nèi)通向內(nèi)實(shí)驗(yàn)室和走廊的門(mén)可安裝一種連鎖裝置，當(dāng)一個(gè)門(mén)打開(kāi)時(shí)，另一門(mén)必須處于關(guān)閉狀態(tài)，防止出現(xiàn)兩個(gè)門(mén)同時(shí)打開(kāi)的情況。產(chǎn)物分析區(qū)可不設(shè)緩沖間，但應(yīng)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)（裝一個(gè)排風(fēng)扇即可），使空氣流向由外向內(nèi)，以防止擴(kuò)增產(chǎn)物的隨空氣流出。每一區(qū)域都須有明確的標(biāo)記，工作按試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)至產(chǎn)物分析區(qū)單一流向進(jìn)行，各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋、實(shí)驗(yàn)記錄本和筆等都必須專(zhuān)用。
如果無(wú)法作到以上模式，以下基本要求必須做到：
1.四個(gè)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的；
2.各區(qū)的儀器設(shè)備及各種物品必須是專(zhuān)用的；
3.各區(qū)完全獨(dú)立，緩沖間可有可無(wú)。如為一個(gè)區(qū)套一個(gè)區(qū)的模式，區(qū)間不能直通，應(yīng)有緩沖間，供換工作服及鞋子用，并保證兩個(gè)區(qū)域間始終處于完全的分隔狀態(tài)；
4.產(chǎn)物分析區(qū)應(yīng)安裝排風(fēng)扇或其它抽風(fēng)裝置，維持負(fù)壓。
實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制
各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。PCR實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
實(shí)驗(yàn)室裝修
實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
實(shí)驗(yàn)室邊臺(tái)產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱(chēng) 益陽(yáng)實(shí)驗(yàn)臺(tái) 材質(zhì) 鋼木結(jié)構(gòu)
設(shè)計(jì)用途 實(shí)驗(yàn)室操作平臺(tái) 生產(chǎn)地區(qū) 廣東深圳
尺寸 根據(jù)客戶的實(shí)際需要X750/1500X850mm 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)室行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)品描述：
選用優(yōu)質(zhì)C字型方鋼框架和環(huán)保型中密度板制造的益陽(yáng)鋼木實(shí)驗(yàn)臺(tái)，益陽(yáng)實(shí)驗(yàn)臺(tái)。臺(tái)面耐酸堿、抗腐蝕，承載力強(qiáng)是湖南省益陽(yáng)市企事業(yè)單位可以選擇的實(shí)驗(yàn)室操作臺(tái)之一。
產(chǎn)品材料詳細(xì)配置說(shuō)明如下：
實(shí)驗(yàn)臺(tái)框架是以優(yōu)質(zhì)C型鋼為支撐，所以也簡(jiǎn)稱(chēng)益陽(yáng)鋼木實(shí)驗(yàn)臺(tái)。
1、框架：采用40x60x1.5mm厚優(yōu)質(zhì)鋼材，經(jīng)牢固焊接，表面酸洗、磷化、電泳、防銹處理、環(huán)氧樹(shù)脂高壓靜電粉末噴涂。具有防腐性好、緊密堅(jiān)固、美觀、承載力≥300kg等特點(diǎn)。
2、臺(tái)面：采用國(guó)際、實(shí)驗(yàn)室行業(yè)通用_實(shí)芯理化板。其耐化學(xué)腐蝕、耐高溫180℃，抗刻刮性能好。
3、箱體：板材采用優(yōu)質(zhì)中密度板，所有箱體板和門(mén)、抽屜面板均雙面粘壓三聚氰胺板，全部截面PVC熱熔膠防水封邊處理，具有防腐、防火、防蛀等性能。
4、柜底離地面約150mm，可微調(diào)，便于地面清掃。
5、不銹鋼承重可調(diào)節(jié)高度地腳，調(diào)整范圍>30mm。
6、臺(tái)面：還可以選用更加耐酸堿，抗腐蝕的環(huán)氧樹(shù)脂板、陶瓷臺(tái)面板等產(chǎn)品。
微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)
微生物實(shí)驗(yàn)室由準(zhǔn)備室、洗滌室、滅菌室、無(wú)菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實(shí)驗(yàn)室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅(jiān)硬，儀器和設(shè)備的陳設(shè)簡(jiǎn)潔，便于打掃衛(wèi)生。
二、微生物實(shí)驗(yàn)室基本要求
（一）準(zhǔn)備室
準(zhǔn)備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專(zhuān)柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
（二）洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過(guò)的器皿已被微生物污染，有時(shí)還會(huì)存在病原微生物。因此，在條件允許的情況下，好設(shè)置洗滌室。室內(nèi)應(yīng)備有加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等，還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
（三）滅菌室
滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌，室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。
（四）無(wú)菌室
無(wú)菌室也稱(chēng)接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作，這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對(duì)接種工作干擾很大。
1. 無(wú)菌室的設(shè)置
無(wú)菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來(lái)設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn)：
（1）無(wú)菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無(wú)菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大，以便于空氣滅菌。小內(nèi)間面積2*2.5＝5m2，外間面積1*2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應(yīng)有天花板。
（2）內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門(mén)，以減少空氣的波動(dòng)，門(mén)應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)遠(yuǎn)的位置上；外間的門(mén)好也用拉門(mén)，要設(shè)在距內(nèi)間遠(yuǎn)的位置上。
（3）在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或隔扇上，應(yīng)開(kāi)一個(gè)小窗，作接種過(guò)程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬1500px、高1000px、厚750px，內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇。
（4）無(wú)菌室容積小而嚴(yán)密，使用一段時(shí)間后，室內(nèi)溫度很高，故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門(mén)處的頂棚上（即離工作臺(tái)遠(yuǎn)的位置），好為雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開(kāi)啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。
2. 無(wú)菌室內(nèi)設(shè)備和用具
（1）無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái)，不論是什么材質(zhì)、用途的，都要求表面光滑和臺(tái)面水平。
（2）在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈（多為30W）。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
（3）外室應(yīng)有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
（4）內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。
3. 無(wú)菌室的滅菌消毒
（1）薰蒸：這是無(wú)菌室滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間，污染比較嚴(yán)重時(shí)，應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌?？捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。
（2）噴霧：在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng)，并有殺菌作用?？捎?%石炭酸噴霧。
（3）紫外線照射：在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開(kāi)啟紫外線燈照射30～60min。
4. 無(wú)菌室工作規(guī)程
（1）無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線燈照射30min以上，或在使用前30min，對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。
（2）用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
（3）將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位，用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進(jìn)內(nèi)室工作。
（4）接種操作前，用70%酒精棉球擦手；進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，動(dòng)作要輕緩，盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。
（5）工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴(kuò)大燃燒；如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí)，應(yīng)用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。
（6）工作結(jié)束，立即將臺(tái)面收拾干凈，將不應(yīng)在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后，對(duì)無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧，或開(kāi)紫外線燈照射30min。
（五）恒溫培養(yǎng)室
1. 培養(yǎng)室的設(shè)置
（1）培養(yǎng)室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)室是培養(yǎng)室，外室是緩沖室。房間容積不宜大，以利于空氣滅菌，內(nèi)室面積在3.2*4.4＝14m2左右，外室面積在3.2*1.8＝6m2左右，高以2.5m左右為宜，都應(yīng)有天花板。
（2）分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應(yīng)設(shè)帶空氣過(guò)濾裝置的通風(fēng)口。
（3）為滿足微生物對(duì)溫度的需要，需安裝恒溫恒濕機(jī)。
（4）內(nèi)外室都應(yīng)在室中央安裝紫外線燈，以供滅菌用。
2. 培養(yǎng)室內(nèi)設(shè)備及用具
（1）內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(jī)（搖床）。常用的搖瓶機(jī)有旋轉(zhuǎn)式、往復(fù)式兩種。
（2）外室應(yīng)有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3. 培養(yǎng)室的滅菌、消毒 同無(wú)菌室的滅菌、消毒措施。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室，而在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。
（六）普通實(shí)驗(yàn)室
進(jìn)行微生物的觀察、計(jì)數(shù)和生理生化測(cè)定工作的場(chǎng)所。室內(nèi)的陳設(shè)因工作側(cè)重點(diǎn)不同而有很大的差異。一般均配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗(yàn)臺(tái)要求平整、光滑，實(shí)驗(yàn)柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
（七）實(shí)驗(yàn)室其他要求
水、電、氣等的容量、布設(shè)、性能均應(yīng)滿足實(shí)驗(yàn)室工作的需要。
鋼木實(shí)驗(yàn)臺(tái)：
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) 鋼木實(shí)驗(yàn)臺(tái) 材質(zhì) 鋼木結(jié)構(gòu)
設(shè)計(jì)用途 實(shí)驗(yàn)室工作平臺(tái) 生產(chǎn)地區(qū)
尺寸 根據(jù)客戶實(shí)際需要X750/1500X850mm 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)室行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)品描述
選用優(yōu)質(zhì)鍍鋅方鋼框架和環(huán)保型中密度板，實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)用實(shí)芯理化板臺(tái)面制造的鋼木實(shí)驗(yàn)臺(tái)，外形美觀。
產(chǎn)品材料詳細(xì)配置說(shuō)明如下：
1、臺(tái)面：優(yōu)質(zhì)實(shí)芯理化板厚12.7mm，臺(tái)面邊緣加厚至25.4mm，耐酸堿防腐蝕;
2、框架：采用40*60mm冷軋鋼框架結(jié)構(gòu)，表面酸洗、磷化后高壓靜電粉末噴涂;
3、箱體：采用優(yōu)質(zhì)中密度板，雙面粘壓三聚氰胺板，PVC熱熔膠封邊，總厚15mm;
4、地腳：采用不銹鋼與尼龍組合一體的可調(diào)地腳，具有防滑減震，高低可調(diào)的功能，可調(diào)高度50mm;
5、滑道：采用優(yōu)質(zhì)靜音三級(jí)滑道;
6、鉸鏈：廣東省優(yōu)質(zhì)DTC五金115°全開(kāi)式金屬鉸鏈;
7、拉手：鋁合金暗拉手。
GMP無(wú)菌潔凈實(shí)驗(yàn)室
GMP領(lǐng)域的常規(guī)品質(zhì)控制區(qū)，它與生產(chǎn)區(qū)、倉(cāng)儲(chǔ)區(qū)、辦公區(qū)、水電氣動(dòng)力區(qū)構(gòu)成常見(jiàn)的GMP工廠（藥廠、醫(yī)療器械廠、食品廠、化妝品廠等）。
常規(guī)品質(zhì)控制區(qū)包含無(wú)菌實(shí)驗(yàn)區(qū)、留樣取樣間、理化實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)實(shí)驗(yàn)室。
多數(shù)工廠其中的無(wú)菌實(shí)驗(yàn)區(qū)常見(jiàn)的劃分為非潔凈區(qū)的準(zhǔn)備間及萬(wàn)級(jí)（2013新版GMP中C級(jí)）的陽(yáng)性對(duì)照間、無(wú)菌檢測(cè)間、微生物限度檢測(cè)間、其分設(shè)的人凈房輔助間（一更洗手、二更穿無(wú)菌服、手消緩沖、洗衣、潔具、工位器具洗存）。
3個(gè)萬(wàn)級(jí)（2013新版GMP中C級(jí)）的陽(yáng)性對(duì)照間、無(wú)菌檢測(cè)間、微生物限度檢測(cè)間中，陽(yáng)性對(duì)照間做相對(duì)負(fù)壓、空調(diào)獨(dú)立全新風(fēng)+過(guò)濾后排風(fēng)；
三個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配超潔凈工作臺(tái)。陽(yáng)性對(duì)照間用生物安全柜與否甲方?jīng)Q定，現(xiàn)行規(guī)范無(wú)強(qiáng)制要求。
溫濕度規(guī)范要求：22±2℃，RH=45%~65%;這有別于低級(jí)別的生產(chǎn)區(qū)（18~28℃）；是否采用恒溫恒濕空調(diào)機(jī)？理論上要，就國(guó)內(nèi)多數(shù)地區(qū)室外氣象參數(shù)
PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室工程
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱(chēng)。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級(jí)別。
1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實(shí)驗(yàn)室;
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前已得到廣泛應(yīng)用。本文試就其定量原理、方法及參照問(wèn)題作一介紹
2、檢測(cè)設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求;
熒光定量PCR儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件，構(gòu)成PCR-DNA/RNA實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)。
3、必須通過(guò)國(guó)家臨床檢驗(yàn)中心的驗(yàn)收和認(rèn)證;
4、檢測(cè)人員必須通過(guò)國(guó)家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書(shū);
PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員必須參加由國(guó)家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗(yàn)中心舉辦的臨床基因擴(kuò)增培訓(xùn)班，并持證上崗。PCR實(shí)驗(yàn)室通過(guò)驗(yàn)收，實(shí)驗(yàn)室至少必須應(yīng)有兩個(gè)以上持有“臨床基因檢測(cè)上崗證”。PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（SOP）、建立系列質(zhì)量管理文件等，確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國(guó)家衛(wèi)生部的要求，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全，確保實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行
全鋼實(shí)驗(yàn)室臺(tái)
采用1.0mm厚，優(yōu)質(zhì)雙面鍍鋅鋼板在數(shù)控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型。酸洗磷化處理，噴涂環(huán)氧樹(shù)脂粉末，高溫烘烤固化，附著力高、表面硬度抗腐蝕性強(qiáng)，外形美觀的全鋼實(shí)驗(yàn)室臺(tái)，全鋼邊臺(tái)是實(shí)驗(yàn)室科研人員可以選擇的實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)之一。
產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱(chēng) 全鋼實(shí)驗(yàn)室臺(tái) 材質(zhì) 全鋼結(jié)構(gòu)
設(shè)計(jì)用途 實(shí)驗(yàn)室工作平臺(tái) 生產(chǎn)地區(qū)
尺寸 根據(jù)客戶實(shí)際需要X750/1500X850mm 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)室行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)品描述
全鋼實(shí)驗(yàn)室臺(tái)，全鋼實(shí)驗(yàn)臺(tái)，全鋼邊臺(tái)：采用1.0mm厚，優(yōu)質(zhì)雙面鍍鋅鋼板在數(shù)控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型。酸洗磷化處理，噴涂環(huán)氧樹(shù)脂粉末，高溫烘烤固化，附著力高、表面硬度抗腐蝕性強(qiáng)，外形美觀的全鋼實(shí)驗(yàn)室臺(tái)，全鋼邊臺(tái)是實(shí)驗(yàn)室科研人員可以選擇的實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)之一。
產(chǎn)品生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單介紹如下：
所有鋼板焊接經(jīng)環(huán)氧樹(shù)脂噴涂后，目視平整無(wú)焊點(diǎn)，所有水、電、氣路安全，適用，隱藏安裝。并在柜體后背板設(shè)有維修孔。
產(chǎn)品材料詳細(xì)配置說(shuō)明如下：
1、外殼：采用1.0mm厚，優(yōu)質(zhì)雙面鍍鋅鋼板在數(shù)控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型，酸洗磷化處理，噴涂環(huán)氧樹(shù)脂粉末，高溫烘烤固化，附著力高，表面硬度抗腐蝕性強(qiáng)，外形美觀。
2、門(mén)板：斜口式，采用1.0mm厚雙面鍍鋅鋼板(雙層)，無(wú)焊連接可拆卸帶減震墊。在數(shù)控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型。酸洗磷化處理，噴涂環(huán)氧樹(shù)脂粉末，高溫烘烤固化。 附著力高，表面硬度抗腐蝕性強(qiáng)，外形美觀。
3、把手：不銹鋼亞光把手或者凹字型拉手。
4、鉸鏈：配置廣東東泰DTC鉸鏈，外形美觀，開(kāi)合無(wú)噪音，次數(shù)達(dá)5萬(wàn)次以上。防銹、耐腐蝕能力強(qiáng)，達(dá)到國(guó)際五金行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。并配有格拉斯導(dǎo)軌。
5、調(diào)整腳：采用10mm注塑調(diào)整腳，防震、防潮、耐腐蝕，可根據(jù)室內(nèi)地坪情況適當(dāng)調(diào)節(jié)柜體高度，大調(diào)節(jié)為0—30mm。
6、臺(tái)面：12.7mm厚優(yōu)質(zhì)實(shí)芯理化板，耐酸堿抗腐蝕。
客服1